產品名稱 | 細胞直接RT-qPCR試劑盒-SYBR Green I QuickEasyTM Cell Direct RT-qPCR Kit–SYBR Green I | |
貨 號 | DRT-01011 | DRT-01012 |
規 格 | 200 T | 1000 T |
價 格 | 詢價 | 詢價 |
描 述 | 直接裂解細胞釋放RNA,進行RT-qPCR;高耐受性體系,使得無需純化RNA,直接使用細胞裂解產物即可作為RNA模板進行RT反應 |
產品名稱 | 細胞直接RT-qPCR試劑盒-SYBR Green I組分補充包-1 Cell Lysis Solution / 細胞裂解液(24-well lysis system / well) | |
貨 號 | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 |
規 格 | 100 T | 500 T |
價 格 | 詢價 | 詢價 |
描 述 | 快速裂解細胞,釋放核酸;試劑盒補充組分,可單購買。 |
產品名稱 | 細胞直接RT-qPCR試劑盒-SYBR Green I組分補充包-2 5× Direct RT Mix / RT反應液(20 μL reaction system) |
貨 號 | DRT-01011-B1 |
規 格 | 200 T |
價 格 | 詢價 |
描 述 | 直接RT反應體系;試劑盒補充組分,可單購買。 |
產品名稱 | 細胞直接RT-qPCR試劑盒-SYBR Green I組分補充包-3 2× qPCR Mix / qPCR反應液(20 μL reaction system) | |
貨 號 | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
規 格 | 200 T | 1000 T |
價 格 | 詢價 | 詢價 |
描 述 | 直接RT后qPCR反應體系;試劑盒補充組分,可單購買。 |
產品介紹
本產品采用獨特的裂解緩沖體系可以快速的從培養細胞樣本中釋放出RNA,用于RT-qPCR反應,消除了費時費力的RNA純化過程,只需7min即可得到所需要的RNA模板,配合試劑盒提供的5× Direct RT Mix 、2× Direct qPCR Mix-SYBR能夠快速有效的得到實時定量PCR結果。
5× Direct RT Mix 和2× Direct qPCR Mix-SYBR 具有很強的抑制物耐受性,能以待測樣本的裂解液為模板,進行高效逆轉和特異性擴增。該試劑包含福際獨有的RNA高親和性Foregene Reverse Transcriptase,以及Hot D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR優化劑和穩定劑,與裂解緩沖液配合使用能夠快速簡便地對樣品進行檢測,并具有靈敏度高、特異性強、穩定性好等特點。
試劑盒應用
適用范圍:培養細胞。
樣本裂解釋放的RNA:僅適用于本試劑盒的RT-qPCR模板。
試劑盒可用于以下用途:基因調控表達分析、驗證siRNA介導的基因沉默效果、藥物篩查等。
試劑盒局限性
擴增片段≤300bp。
試劑盒用于新鮮培養細胞。
試劑盒內容
Part I
Buffer CL:提供細胞裂解反應所需環境。
Buffer ST:終止裂解液中的活性物質,避免對后續RT造成影響。
Foregene Protease Plus II:在裂解緩沖液的環境下,裂解細胞,釋放核酸。
Part II
DNA Eraser:DNA 去除劑,去除基因組對后續實驗的影響。
5× Direct RT Mix:包含福際生物專門研制的高RNA親和性Foregene Reverse Transcriptase,以及RNase Inhibitor、dNTPs、穩定劑、增強劑、優化劑及優化配比的逆轉錄引物(Random Primer、Oligo(dT)18 Primer)。
2× Direct qPCR Mix-SYBR:該試劑包含福際生物Hot D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、SYBR Green I、PCR優化劑和穩定劑。
ROX Reference Dye:一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR擴增儀上,用于調整PCR加樣誤差所引起的 PCR管與管之間的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye濃度不同,用戶可以根據儀器的推薦濃度添加。
RNase-Free ddH2O:無RNase滅菌超純水,用于兩步法RT-qPCR反應。
儲存條件
全程低溫冰盒運輸,保證試劑盒Part I、Part II處于<4℃狀態。
本試劑盒Part I保存在2-8℃;Part II保存在-20℃。
v Foregene Protease Plus II應置于4℃保存,切勿凍存于-20℃。
v 試劑2× Direct qPCR Mix-SYBR避光保存于-20°C;若頻繁使用,也可置于 4°C短期保存(限 10 天內用完)。
說明書
產品文獻
MSDS
COA
Real Time PCR引物設計原則
Answer
Forward Primer和Reverse Primer
進行Real Time PCR,引物設計非常重要。引物關系到PCR擴增的特異性、高效性等,可以參照以下原則進行引物設計:
u 引物長度:18-30bp。
u GC含量:40-60%。
u Tm值:引物設計軟件,如Primer 5,可以給出引物的Tm值。上下游引物的Tm值應 盡量接近。也可以使用Tm計算公式:Tm=4℃(G+C)+2℃(A+T)。進行PCR時,一般選擇低于引物Tm值5℃的溫度作為退火溫度(相應的提高退火溫度可以增加PCR反應的特異性)。
u 引物及PCR產物:
v 設計引物PCR擴增產物長度最好在100-150bp。
v 應盡量避開在模板的二級結構區域設計引物。
v 避免上下游引物3’端之間形成2個或2個以上的互補堿基。
v 引物3’端堿基不能存在多余3個連續的G或C。
v 引物自身不能存在互補結構,否則會形成發夾結構,影響PCR擴增。
v 引物序列中ATCG應盡量分布均勻,3’端堿基避免為T。
采用獨特的裂解緩沖體系,只需 7 min 即可得到所需要的 RNA 模板,進行RT-qPCR檢測。
該試劑盒針對 96 孔培養細胞進行微量體系裂解,具有很好的均一性和一致性,能滿足 96 孔細胞整版一次性使用,避免試劑反復開啟、凍融等操作帶來的污染和試劑性能降低。
采用獨特的裂解緩沖體系,只需 7 min 即可得到所需要的 RNA 模板,進行RT-qPCR檢測。
該試劑盒針對 96 孔培養細胞進行微量體系裂解,具有很好的均一性和一致性,能滿足 96 孔細胞整版一次性使用,避免試劑反復開啟、凍融等操作帶來的污染和試劑性能降低。
無需純化,快速從細胞中釋放RNA,直接進行RT反應;搭配試劑盒提供的Direct qPCR Mix進行qPCR反應鑒定。